实验原理
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂在加速剂过硫酸铵或核黄素的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳。
聚丙烯酰胺凝胶具有下列特性:
1. 在一定浓度时,凝胶透明,有弹性,机械性能好;
2. 化学性能稳定,与被分离物不起化学反应,在很多溶剂中不溶;
3. 对PH和温度变化较稳定;
4. 几乎无吸附和电渗作用,只要Acr纯度高,操作条件一致,则样品分离重复性好;
5. 样品不易扩散且用量少;
6. 凝胶孔径可调节,根据被分离物的相对分子质量选择合适的浓度,通过改变单体及交联剂的浓度调节凝胶的孔径;
7. 分辨率高。
血清蛋白在纸或醋酸纤维薄膜电泳中,只能分离出5~6条区带,而聚丙烯酰胺电泳却可分离出数十条区带,因而,目前PAGE已广泛用于科研、农、医及临床诊断的分析、制备,如蛋白质、酶、核酸、血清蛋白、脂蛋白的分离及病毒
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